普鲁氏蓝染色法(铁染色)主要显示三价铁盐,是显示含铁血黄素的一种传统方法。人体内的铁有一定量以铁蛋白和含铁血黄素的形式贮存在骨髓中的单核-吞噬细胞胞质内,幼红细胞的线粒体中也有含铁血黄素。含铁血黄素是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其含铁、金黄色,故称为含铁血黄素。这些铁在酸化的低铁氰化钾溶液中反应,生成蓝色的铁氰化铁沉淀(普鲁士蓝),定位于含铁的部位。故此染色法又称为普鲁士蓝反应
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普鲁氏蓝染色法(铁染色)主要显示三价铁盐,是显示含铁血黄素的一种传统方法。人体内的铁有一定量以铁蛋白和含铁血黄素的形式贮存在骨髓中的单核-吞噬细胞胞质内,幼红细胞的线粒体中也有含铁血黄素。含铁血黄素是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其含铁、金黄色,故称为含铁血黄素。这些铁在酸化的低铁氰化钾溶液中反应,生成蓝色的铁氰化铁沉淀(普鲁士蓝),定位于含铁的部位。故此染色法又称为普鲁士蓝反应
张
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一、组织样本
固定组织(2-8℃运输,切忌不能冰冻)
1、用PBS清洗干净血液等,且取材过程中保证组织完整性,避免破坏组织形态;
2、组织体积不超过2×2×0.5cm,固定时尽量保持组织的原有形态并清理干净血液及多余部分,如肠道内容物;固定液体积为组织大小的10倍以上,容器足够容纳组织不使其挤压变形。标注好固定液类型和固定时长;
3、特殊固定组织:睾丸、眼球、脊髓、肌肉等组织:推荐使用对应的特殊固定液进行固定,以保证固定效果。如Bouin液,适用于睾丸组织、皮肤组织及眼球的固定。
组织蜡块(常温运输)
组织由标准的石蜡包埋盒包埋(尺寸为30×24×7mm),石蜡与组织要均匀接合,不能有裂痕;蜡块厚度根据所需切片的数量而定,有效厚度至少要超过0.1cm。尽量提供半年内的组织蜡块,超过半年的蜡块抗原可能丢失,做免疫组化可能出现检测不到蛋白的现象。
组织切片(常温运输)
需用防脱载玻片进行捞片,并注明切片厚度、已烤片温度与时间,样本编号,组织应在靠近切片下端1/3处。
二、细胞样本
细胞块石蜡切片(常温运输)
对于一些细胞量较多的样本,可以离心分离所需的细胞,用中性甲醛固定后,制作成琼脂细胞块。然后按照制作石蜡切片的操作流程制成石蜡切片,寄送时间不超过制作后24h。
细胞爬片(2-8℃运输,即冰袋)
1、在孔板里做的细胞爬片,爬片取出后,用PBS洗2次,然后用4%多聚甲醛4℃固定15min,将表面液体吹干,放入-20℃保存;
2、根据研究目的,PBS洗也不是一定要做的,比如细胞凋亡的TUNEL染色;
3、mRNA原位杂交:经4%多聚甲醛固定,固定液要用DEPC水配制;
4、寄送时间不超过制作后24h。
细胞涂片(2-8℃运输,即冰袋)
细胞涂片常用的固定液有95%酒精、酒精-冰醋酸液、乙醚-酒精液和Carney`s液等,其中95%酒精较为常用,寄送时间不超过制作后24h。
三、植物样本(常温运输)
新鲜组织FAA固定,木质化程度不高;对于较薄的叶片,如果要求平行叶片切片,难以保证切完整;根茎要求直径>1mm。
注意:
寄送的固定组织固定时间不宜太短,也不宜过长。固定时间太短,就会影响组织固定的效果。时间太长,固定液会影响核的染色。对于固定很长时间的标本制片后切片染色不鲜艳,显得非常陈旧。
温馨提示:
1、向中科赛恩斯(以下简称“我司”)寄送样本或试剂等请先与项目专员进行沟通,约定好时间后再进行寄送。
2、未沟通或未经项目专员同意寄送的样本,出现任何问题,我司均不承担责任。
3、寄送样本请提前检查标识是否清楚,并尽可能在快递中附样本明细。即:样本编号、样本数量、样本类型等详细信息;以保证样本尽快被接收并良好储存,无人认领样本,我司将会予以清除处理。
4、在无特殊情况下,我司不接收邮费到付的样本。